HPLC法探测益气温阳胶囊中阿魏酸的含量

　　益气温阳胶囊是由红参、附子、甘草三味中药组成的复方制剂.具有 益气温阳,救逆固脱的功效,用于阳气亏耗,阳不制阴,所表现出的畏寒肢冷、四肢厥逆等虚寒证候;也可用于阳虚(气虚)所致的惊悸、怔忡、喘咳、泻泄等症. 该课题以中医药理论为指导,依照《药品注册管理办法》的要求,对益气温阳胶囊进行了临床前药学部分的研究.下面是小编搜集整理的相关内容的论文，欢迎大家阅读参考。

　　摘要:目的 建立HPLC测定益气温阳胶囊中的有效成分其他阿魏酸含量的方法。 方法 采用色谱柱为C18柱，流动相：甲醇水冰醋酸(体积比25∶75∶0.35)，检测波长为320 nm。结果 阿魏酸在0.02~0.20 μg范围内与峰面积呈线性关系，胶囊中阿魏酸的平均回收率为98.8%，RSD=0.97%。结论 方法简便、稳定，能有效地控制该制剂的质量。

　　关键词:益气温阳胶囊;高效液相色谱法;阿魏酸

　　Abstract: Objective To establish a method for the determination of ferulic acid in Yiqiwenyang capsules. Method Samples were extracted with ethyl acetate, and separated on a C18 column(5μm， 250 mm×4.6 mm) using methanol-wateracetic acid (25∶75∶035) as mobile phase. The detection wavelength was set at 320 nm. Results The calibration curve of ferulic acid was linear in the range of 0.02~0.20 μg. The average recovery was 98.8% with RSD 0.97% (n=5). Conclusions The method could be used for the quality control of Yiqiwenyang capsules.

　　Key words:Yiqiwenyang capsules; HPLC; ferulic acid

　　益气温阳胶囊系由黄芪、硫磺、当归、川芎等十三味药材加工提取制得的制剂，具有温阳益气，活血通络的功效。由于现行质量标准中没有建立含量测定方法，不利于制剂的质量控制。通过处方分析，我们选择了测定方中臣药当归、川芎的有效成分阿魏酸作为质量控制的指标。据文献报道，阿魏酸具有明显扩张冠状动脉血管、增加冠脉流量、抑制ADP诱导的血小板凝聚、增强细胞吞噬功能的作用[1]。本文采用HPLC法测定了阿魏酸的含量，为控制该产品的质量提供了依据。

　　一、仪器与试药

　　SHIMADZU SPD-10A型高效液相色谱仪;HW-2000工作站。阿魏酸对照品由中国药品生物制品检定所提供(0773-9910);实验用水为重蒸馏水;甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯;益气温阳胶囊(广州市花城制药厂提供，批号20020501、20020803、20020902)。

　　二、方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　色谱柱为Hypersil BDS C18 柱(5 μm， 250 mm×4.6 mm)，流动相为甲醇水冰醋酸( 25∶75∶0.35)，流速：1.0 mL/min，检测波长为320 nm;柱温为室温。

　　2.2 溶液的制备

　　2.2.1 对照品溶液的制备

　　取阿魏酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇配制成每1 mL含阿魏酸0.01 mg的`溶液，即得。

　　2.2.2 供试品溶液的制备

　　取本品30粒，倾出内容物，研细，取6 g，精密称定，置索氏提取器中，加乙酸乙酯50 mL，水浴中避光加热回流至浸出溶液无色，放冷，取出，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至20 mL棕色瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

　　2.3 系统适用性试验[2]

　　2.3.1 阴性对照液的制备

　　按处方量称取不含当归、川芎的各味药材，按工艺制成制剂,再按供试品溶液制备方法配制阴性对照液。

　　2.3.2 系统适用性

　　在上述色谱条件下，分别取阿魏酸对照品溶液、供试品溶液和阴性对照液各10 μL测定，供试品阿魏酸与相邻杂质分离度大于1.5，阴性对照液在与阿魏酸对照品相同保留时间处未见色谱峰，认为不干扰测定。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于3000。见图1。

　　2. 4 线性关系考察

　　精密吸取对照品溶液(0.01 mg/mL)2.0、5.0、100、15.0、20.0 μL，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值(A)为纵坐标，阿魏酸量(m)为横坐标进行线性回归。结果表明，峰面积与阿魏酸量呈良好线性关系，回归方程为A=4595350m+2129.27，r=0.9998，阿魏酸量在0.02～0.20 μg范围内与峰面积呈线性关系。　　2.5 精密度试验

　　精密吸取同一对照品溶液(0.01 mg/mL)，依法连续进样6次，每次10 μL，峰面积结果分别为466820、473352、467155、463808、471712、472915，平均值为469294，其RSD为0.83%。

　　2.6 稳定性试验

　　取同一批样品(批号：20020902 )避光放置，在0、1、2、3、6、12 h分别进样10 μL，依法测定含量，结果RSD为1.12%，表明供试品在避光放置条件下12 h内较稳定。

　　2.7 回收率试验

　　采用加样回收法，精密称取已知含量的益气温阳胶囊，分别加入一定量的阿魏酸对照品溶液(0.01 mg/mL)，按样品测定方法测定含量，结果见表1。表1 阿魏酸回收率测定结果(略)

　　2.8 样品含量测定

　　取对照品溶液(0.01 mg/mL)和供试品溶液，用045 μm微孔滤膜过滤,各进样10 μL，读取峰面积,按外标法计算含量，结果见表2。表2 3批益气温阳胶囊阿魏酸含量(略)

　　三、 讨论

　　3.1 有关制剂中阿魏酸的高效液相测定方法已有多篇文献[3-4] 报道。曾参照文献[4]的方法，采用甲醇冰酸酸(体积比45∶55) 为流动相，结果供试品中阿魏酸与相邻杂质分离度小于1.5。本文将流动相组成调整为甲醇水冰醋酸(体积比25∶75∶0.35)，供试品中阿魏酸与相邻杂质分离度大于1.5，阿魏酸峰峰形较好。

　　3.2 阿魏酸对光不稳定，配成溶液后及样品的制备过程中注意避光，否则会引起阿魏酸的含量降低。

　　3.3 用高效液相色谱法测定阿魏酸的含量，使用简单的体系就达到分离测定的目的，方法稳定，结果准确，可作为本品的质量控制方法。

　　参考文献:

　　[1]郑虎占. 中药现代研究与应用(第一卷)[M].北京：学苑出版社，1997：910.

　　[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].化学工业出版社，2000：附录38-40.

　　[3]王宝.中成药质量标准与标准物质研究[M].北京：中国医药科技出版社，1994： 439.

　　[4]刘义梅.HPLC法测定复方银杏口服液中阿魏酸的含量[J].中药材，2005，28(2)：147