进境美国小麦中小麦矮腥黑穗病菌及其近似种的鉴定(第2页)
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如表2所示,5种腥黑粉菌的冬孢子形态非常相似,其中T.caries冬孢子颜色较深,网脊较低,网目小,网目数多,胶质鞘薄且不明显,其余4种腥黑粉菌的冬孢子网脊高,网目大,网目数少,胶质鞘厚且明显。从萌发生理看,5种腥黑粉菌的冬孢子的萌发温度上存在一定交叉,TCK适宜温度最低为5℃,其余4种腥黑粉菌冬孢子的萌发温度范围广,15℃~20℃仍能萌发。T.vankyi与其余4种腥黑粉菌最显著的区别是冬孢子间无融合现象(“H”结),而在TCK与T. bromi、T. caries、T. fusca中却普遍存在。
腥黑粉菌属真菌分类的主要依据是形态学、萌发生理、细胞学等方面的特性以及寄主专化性。但在实际检验检疫过程中,腥黑粉菌属冬孢子的萌发培养需要很长时间,若冬孢子休眠,萌发量又少,则可能出现冬孢子不萌发的情况,无法在短时间内鉴定到种。因此,现在有许多研究以分子生物学方法来快速鉴定腥黑粉菌,上海检验检疫局利用ITS 和mtDNA 序列对进境美国小麦中截获的单个腥黑粉菌冬孢子进行扩增检测,鉴定了进境美国小麦样品中的腥黑粉菌为T. walkeir,并利用ITS区序列和特异性引物PCR分别对进境麦秆中截获的单个腥黑菌冬孢子进行扩增检测,鉴定进境麦秆中的腥黑粉菌为TIM。但TCK及其近似种的冬孢子直径平均要比TIM小10μm左右,挑取更为困难,天津检验检疫局改进冬孢子破碎的方法,建立了雀麦上T. bromi的菌丝基因组DNA的特异PCR检测方法和冬孢子的套式特异PCR 检测方法,并利用ITS、IGS等基因序列信息,鉴定了美国紫羊茅、澳大利亚多年生黑麦草和德国多年生黑麦草中携带的T.vankyi。为TCK近似种的检疫鉴定提供了快速、可靠的检测方法。
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